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你真的了解犇血清吗?
发布时间:2019-11-25 05:11

  上期文章据说Gibco的血清空瓶50元一个……还是蛮受欢迎的,评论里有好多童鞋对于牛血清的分类、制作工艺、质检标准等问题心存疑虑,由于朋友Z已经不知去向,那X湿兄只能靠自己了,X湿兄查阅了很多资料和文献,今天就简单科普

  ①胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS)是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清,其胎球蛋白较多,血清白蛋白含量高,而γ-球蛋白含量极低甚至没有,并富含多种生长因子,是培养细胞最优质的血清。

  ②新生牛血清(newbornbovine serum)取自出生时间在24小时内的新生牛,其内含多种生长因子。

  ③新生小牛血清(Calf serum, CS)指出生后饲养一定时间(一周至六个月)再采集加工而成的血清,因与外界接触时间过长,故血清内γ-球蛋白含量较高,不利于细胞培养,特别是不利于病毒研究与疫苗生产。

  三者所含的促细胞生长细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同,用途与用法不同:某些细胞必需胎牛血清才能生长,而有些细胞只需小牛血清即可,使用浓度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的浓度在20%。

  其实,除了一些比较娇贵的细胞,如干细胞之类的,其余的大部分细胞培养,用国产的足以!抛开要发好一点的文章来说,这是个明智的选择。如果想发好文章,那就要和国际接轨了,烧一点钱,影响因子提高点,也值啊。

  不同批次的牛血液的成分不尽相同,这是导致血清批间差的原因,以下是牛血清的生产工艺示意图:

  (1)渗透压(280-340mOsmol/kg):使用凝固点降低的方法检测渗透压,使用国家标准技术研究所标定的标准溶液对渗透压仪器进行校准;

  (2)PH值(7.0-7.5):同样使用国家标准技术研究所标定的标准溶液对pH计进行校准;

  (3)蛋白含量:(电容法)样品被加到醋酸纤维素介质中并在缓冲溶液体系内迁移,条带经染色、清洁、干燥后用密度仪进行扫描以检测蛋白组分的相对浓度。

  球蛋白和血红蛋白随着牛年龄的增加血清中总蛋白含量相应增加,总的血清蛋白含量可以确认产品的规格和年龄。

  (2)支原体:(培养法及DNA染色法)在支原体专业培养基上培养3-4周,培养温度34°C~36°C分别在需氧和厌氧的条件下进行,有的还需要在支原体琼脂培养皿上传4代,Hoechst荧光素DNA染色检查哪些培养法无法检出的支原体如猪鼻支原体等。